ES细胞打靶

ES细胞是指小鼠胚胎干细胞（Embryonic stem cell），ES细胞打靶是指在ES细胞中进行目标基因编辑，将编辑成功的ES细胞重新注射到小鼠囊胚腔中，形成嵌合体胚胎，最终发育为嵌合体小鼠。与CRISPR/CAS9基因编辑技术相比，ES打靶技术更适用于构建策略复杂或插入片段相对较大的基因编辑小鼠模型。

ES细胞打靶是在小鼠ES细胞中进行目的DNA同源重组，将重组后的ES细胞注射回囊胚腔中，并将胚胎移植至代孕母鼠子宫，18天后嵌合体小鼠出生。通过嵌合体小鼠与野生型小鼠的交配，ES细胞中携带的遗传信息传递至后代小鼠。

优点：

• 精准编辑，无脱靶
• 可进行各种复杂的基因改造
• 可进行大片段基因编辑

ES细胞打靶技术路线示意图

实验周期与流程：

从载体构建至F1代阳性小鼠出生，共历经9-12个月。