miRNA荧光定量PCR试剂盒
Hairpin-itTM MicroRNAs Quantitation PCR的特点: 高度特异,特异性的Stem-loop RT primer与miR-specific Molecular Beacon probe双重保证,确保反应不受其前体及其他因素干扰;序列高度同源的miRNAs也可精确区分;
目前,最常用的检测和定量MicroRNA的方法是northern杂交, 芯片(microarrays)以及核糖核酸酶保护分析(ribonuclease protection assays),这些传统方法都需要标记探针并与纯化的RNA进行杂交。由于成熟的miRNAs及其前体共享一段相同的靶序列,而目前基于杂交的各种技术又无法通过分子大小将它们区分,因此很难专一性的识别成熟miRNAs,结果导致很高的前体背景信号。
此外,基于杂交的各种技术需要标记步骤或放射性同位素,所得数据的动态分布范围又很有限,使得miRNAs的检测非常困难、费时且昂贵。
Hairpin-itTM Real-Time PCR miRNAs定量检测方法
GenePharma microRNAs 定量PCR检测解决方案
Hairpin-itTM miRNAs qPCR Quatitation Assay 包括两步
Stem-loop RT 2. Real-time PCR
Stem-loop RT primer 与miroRNA 分子的3’端结合,然后用逆转录酶将RNA逆转录成cDNA;
将得到RT产物与miroRNA特异引物以及荧光标记的Molecular Beacon probes一起进行优化的real-time PCR反应。
Hairpin-itTM miRNAs qPCR Quantitation Assay原理
Hairpin-itTM miRNAs Real-time PCR Quantitation Assay 的动态范围及灵敏度
Hairpin-itTM miRNAs Real-time PCR Quantitation Assay标准曲线
Hairpin-itTM MicroRNAs Quantitation PCR的特点
高度特异,特异性的Stem-loop RT primer与miR-specific Molecular Beacon probe双重保证,确保反应不受其前体及其他因素干扰;序列高度同源的miRNAs也可精确区分;
超宽的定量线性范围和高度检测灵敏度,从几个拷贝一直到几万个拷贝,定量线性范围跨越7个数量级;
样品消耗量少,仅需1-10ng total RNA;
适用的样品范围广,total RNA、细胞裂解物以及纯化的RNA都可以用于qRT-PCR 的模板,即使基因组DNA的污染也不会干扰miRNA的定量;
金牌质量的miRNA标准合成物,即可精确用来作标准曲线绝对定量之用,又可用来作相对定量的阳性对照
操作快速简单,可实现RT与PCR反应一步完成;
重复性好,经过吉玛公司经验丰富的技术人员严格的质量检验。
Hairpin-itTM miRNAs qPCR Quantitation Kit | ||
目录号 | 规格 | 价格 |
E01006 | 50 rxns | ¥600 |
E01007 | 100 rxns | ¥1,100 |
E01008 | 200rxns | ¥2,000 |
E01009 | 300rxns | ¥2,500 |
E01005 | 500 rxns | ¥3,600 |
试剂盒组成(20μl×100 rxns) |
产品特点 |
1、高度特异性的miRNA Hairpin primer; 2、只对成熟MicroRNAs进行定量,不受其前体干扰;序列高度同源的miRNAs也可精确区分; 3、灵敏度极高,仅需1-10ng的total RNA或同等物。 4、超宽的定量线性范围,可跨越7个数量级,从几个拷贝一直到几百万个拷贝。 5、可实现对每个细胞所含目标miRNA分子进行准确定量 6、试剂盒内含合成的miRNA标准品一支 |
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适用的荧光定量PCR仪器 | |
ABI PRISM 7000/7300/7500/7900 MJ-opticon、Opticon2及Chromo4 系列、MX3000p/4000 Bio-Rad IQ系列、Light Cycler、Rotogene3000、FTC-2000。 |