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miRNA荧光定量PCR试剂盒

Hairpin-itTM MicroRNAs Quantitation PCR的特点: 高度特异,特异性的Stem-loop RT primer与miR-specific Molecular Beacon probe双重保证,确保反应不受其前体及其他因素干扰;序列高度同源的miRNAs也可精确区分;

产品描述
实验数据
使用方法
应用实例
订购须知

目前,最常用的检测和定量MicroRNA的方法是northern杂交, 芯片(microarrays)以及核糖核酸酶保护分析(ribonuclease protection assays),这些传统方法都需要标记探针并与纯化的RNA进行杂交。由于成熟的miRNAs及其前体共享一段相同的靶序列,而目前基于杂交的各种技术又无法通过分子大小将它们区分,因此很难专一性的识别成熟miRNAs,结果导致很高的前体背景信号。 

此外,基于杂交的各种技术需要标记步骤或放射性同位素,所得数据的动态分布范围又很有限,使得miRNAs的检测非常困难、费时且昂贵。

Hairpin-itTM Real-Time PCR miRNAs定量检测方法

GenePharma microRNAs 定量PCR检测解决方案





Hairpin-itTM miRNAs qPCR Quatitation Assay 包括两步

Stem-loop RT 2. Real-time PCR

Stem-loop RT primer 与miroRNA 分子的3’端结合,然后用逆转录酶将RNA逆转录成cDNA;
将得到RT产物与miroRNA特异引物以及荧光标记的Molecular Beacon probes一起进行优化的real-time PCR反应。

Hairpin-itTM miRNAs qPCR Quantitation Assay原理






Hairpin-itTM miRNAs Real-time PCR Quantitation Assay 的动态范围及灵敏度



Hairpin-itTM miRNAs Real-time PCR Quantitation Assay标准曲线


Hairpin-itTM MicroRNAs Quantitation PCR的特点

高度特异,特异性的Stem-loop RT primer与miR-specific Molecular Beacon probe双重保证,确保反应不受其前体及其他因素干扰;序列高度同源的miRNAs也可精确区分;

超宽的定量线性范围和高度检测灵敏度,从几个拷贝一直到几万个拷贝,定量线性范围跨越7个数量级;

样品消耗量少,仅需1-10ng total RNA;

适用的样品范围广,total RNA、细胞裂解物以及纯化的RNA都可以用于qRT-PCR 的模板,即使基因组DNA的污染也不会干扰miRNA的定量;

金牌质量的miRNA标准合成物,即可精确用来作标准曲线绝对定量之用,又可用来作相对定量的阳性对照

操作快速简单,可实现RT与PCR反应一步完成;

重复性好,经过吉玛公司经验丰富的技术人员严格的质量检验。

Hairpin-itTM miRNAs qPCR Quantitation Kit
目录号 规格 价格
E01006 50 rxns ¥600
E01007 100 rxns ¥1,100
E01008 200rxns ¥2,000
E01009 300rxns ¥2,500
E01005 500 rxns ¥3,600

产品特点

高度特异性的miRNA Hairpin primer;
只对成熟MicroRNAs进行定量,不受其前体干扰;序列高度同源的miRNAs也可精确区分;
灵敏度极高,仅需1-10ng的total RNA或同等物;
超宽的定量线性范围,可跨越7个数量级,从几个拷贝一直到几百万个拷贝;
可实现对每个细胞所含目标miRNA分子进行准确定量;
试剂盒内含合成的miRNA标准品一支。
□适用的荧光定量PCR仪器 
ABI PRISM 7000/7300/7500/7900
MJ-opticon、Opticon2及Chromo4 系列、MX3000p/4000
Bio-Rad IQ系列、Light Cycler、Rotogene3000、FTC-2000

试剂盒组成(20μl×100 rxns)

Real-time PCR Master Mix(2×)* 1ml×1支 
miRNA Hairpin-primer Set(5μM)80μl×1支 
miRNA RT primer(10μM) 15μl×1支 
Taq DNA polymerase (5U/μl)20μl×1支 
Synthetic miR-16 Standard 1支
1X RNA Dilution buffer 1ml×1支

*内含dNTP Mixture,Mg2+,SYBR Green1等.

试剂盒的保存

-20℃ 避光保存,避免反复冻融。保质期6个月.

产品特点

1、高度特异性的miRNA Hairpin primer;

2、只对成熟MicroRNAs进行定量,不受其前体干扰;序列高度同源的miRNAs也可精确区分;

3、灵敏度极高,仅需1-10ng的total RNA或同等物。

4、超宽的定量线性范围,可跨越7个数量级,从几个拷贝一直到几百万个拷贝。

5、可实现对每个细胞所含目标miRNA分子进行准确定量

6、试剂盒内含合成的miRNA标准品一支

适用的荧光定量PCR仪器
ABI PRISM 7000/7300/7500/7900 MJ-opticon、Opticon2及Chromo4 系列、MX3000p/4000 Bio-Rad IQ系列、Light Cycler、Rotogene3000、FTC-2000。
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