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吉玛产品

mRNA荧光定量PCR试剂盒

吉玛提供的mRNA检测试剂盒为客户提供了一种便捷,准确的基因定量检测方法,吉玛公司为您精心设计的基因特异性引物,并且提供预优化的反应体系,检测特异性强,扩增效率高,为您提供相关基因研究提供了强有力的工具。

产品描述
实验数据
使用方法
应用实例
订购须知

Custom Real-Time PCR 

Gene Detection Assay
目录号
规格
价格
E021001
50 rxns
¥600
E021002
100 rxns
¥1,100
E021003
200 rxns
¥2,000
E021004
300rxns
¥2,500
E021005
500 rxns
¥3,600

 

试剂盒组成20μ反应体系×100次)

Real-Time PCR Master Mix(2×Conc.)* 1.0 ml×1 支 
Taq DNA polymerase (5U/μl)20μl×1支 
Oligo dT15 (50μM)50μl×1支 
dd H2O 1ml×1支 

*内含dNTP Mixture, Mg2+等。

产品特点

预先优化好的荧光定量PCR反应体系;

应用TaqMan荧光PCR基因检测技术;

实验操作简便,只需加入模板和Taq 酶即可;

用本试剂盒就可完成目标基因检测和表达定量研究;

轻松获得基因表达实验结果。

服务特点


您只需要提供您感兴趣基因的GeneBank登录号。

免费设计引物和探针服务。

免费优化反应体系服务。

免费实验过程技术支持服务。

试剂盒原理
本试剂盒采用Displacement probe和TaqMan荧光PCR基因检测技术。原理请参阅请参阅A2、A4及F2页。

 

GAPDH Gene

Endogenous Control Kit
目录号 规格 价格
E03002 100 rxns ¥1,000
E03003 200 rxns ¥1,600
E03004 300rxns ¥2,500
E03005 500 rxns ¥3,800

 

 

试剂盒组成(20μl 反应体系×100次)

Real-Time PCR Master Mix(2×Conc.)*
1.0 ml×1支Taq DNA polymerase (5U/μl) 20μl×1支GAPDH RT Primer (10μM) 15μl×1支GAPDH Primer set (5μM)
80μl×1支dd H2O 1ml×1支
*内含dNTP Mixture, Mg2+等。

产品特点
预先优化好的荧光定量PCR反应体系;
应用TaqMan荧光PCR基因检测技术检测样本中GAPDH基因;
实验操作简便,只需加入模板和Taq 酶即可。
可直接用于以GAPDH为内参照的基因表达定量研究

适用的荧光定量PCR仪器

ABI PRISM 7000/7300/7500/7900
MJ-opticon、Opticon2及Chromo4 系列
Bio-Rad IQ系列、Light Cycler、Rotogen 3000
X3000P/4000、FTC-2000

 

-actin Gene

Endogenous Control Kit
目录号 规格 价格
E04002 100 rxns ¥1,000
E04003 200 rxns ¥1,600
E04004 300rxns ¥2,500
E04005 500 rxns ¥3,800

 

试剂盒组成(20μl 反应体系×100次)

Real-Time PCR Master Mix(2×Conc.)* 1.0 ml×1支Taq DNA polymerase (5U/μl) 20μl×1支β-actin RT Primer (10μM) 15μl×1支β-actin Primer set (5μM)80μl×1支dd H2O 1ml×1支
*内含内含dNTP Mixture, Mg2+等。

产品特点

预先优化好的荧光定量PCR反应体系;

应用TaqMan荧光PCR基因检测技术检测样本中的β-actin基因;

实验操作简便,只需加入模板和Taq 酶即可。

可直接用于以β-actin为内参照的基因表达定量研究。

适用的荧光定量PCR仪器

ABI PRISM 7000/7300/7500/7900

MJ-opticon、Opticon2及Chromo4 系列

Bio-Rad IQ系列、Light Cycler、Rotogen 3000

MX3000P/4000、FTC-2000


目录号 产品名称 规格 价格
E05001 B2M (beta-2-microglobulin) 对照试剂盒 50 rxns ¥600
E05002 B2M (beta-2-microglobulin) 对照试剂盒 100 rxns ¥1,100
E05003 B2M (beta-2-microglobulin) 对照试剂盒 200 rxns ¥2,000
E05004 B2M (beta-2-microglobulin) 对照试剂盒 300 rxns ¥2,500
E06001 GUSB (beta glucuronidase) 对照试剂盒 50 rxns ¥600
E06002 GUSB (beta glucuronidase) 对照试剂盒 100 rxns ¥1,100
E06003 GUSB (beta glucuronidase) 对照试剂盒 200 rxns ¥2,000
E06004 GUSB (beta glucuronidase) 对照试剂盒 300 rxns ¥2,500
E07001 HPRT1 (HGPRT) 对照试剂盒 50 rxns ¥600
E07002 HPRT1 (HGPRT) 对照试剂盒 100 rxns ¥1,100
E07003 HPRT1 (HGPRT) 对照试剂盒 200 rxns ¥2,000
E07004 HPRT1 (HGPRT) 对照试剂盒 300 rxns ¥2,500
E08001 PGK1(phosphoglycerate kinase 1) 对照试剂盒 50 rxns ¥600
E08002 PGK1(phosphoglycerate kinase 1) 对照试剂盒 100 rxns ¥1,100
E08003 PGK1(phosphoglycerate kinase 1) 对照试剂盒 200 rxns ¥2,000
E08004 PGK1(phosphoglycerate kinase 1) 对照试剂盒 300 rxns ¥2,500
E09001 PPIA(cyclophilin) 对照试剂盒 50 rxns ¥600
E09002 PPIA(cyclophilin) 对照试剂盒 100 rxns ¥1,100
E09003 PPIA(cyclophilin) 对照试剂盒 200 rxns ¥2,000
E09004 PPIA(cyclophilin) 对照试剂盒 300 rxns ¥2,500
E10001 RPLP0(large ribosomal protein) 对照试剂盒 50 rxns ¥600
E10002 RPLP0(large ribosomal protein) 对照试剂盒 100 rxns

¥1,100

E10003 RPLP0(large ribosomal protein) 对照试剂盒 200 rxns ¥2,000
E10004 RPLP0(large ribosomal protein) 对照试剂盒 300 rxns ¥2,500
E11001 TBP(TATA-box binding protein) 对照试剂盒 50 rxns ¥600
E11002 TBP(TATA-box binding protein) 对照试剂盒 100 rxns ¥1,100
E11003 TBP(TATA-box binding protein) 对照试剂盒 200 rxns ¥2,000
E11004 TBP(TATA-box binding protein) 对照试剂盒 300 rxns ¥2,500
E12001 TFRC(CD71)(transferrin receptor) 对照试剂盒 50 rxns ¥600
E12002 TFRC(CD71)(transferrin receptor) 对照试剂盒 100 rxns ¥1,100
E12003 TFRC(CD71)(transferrin receptor) 对照试剂盒 200 rxns ¥2,000
E12004 TFRC(CD71)(transferrin receptor) 对照试剂盒

300 rxns

¥2,500
E13001 Mouse ACTB(actin, beta) 对照试剂盒 50 rxns ¥600
E13002 Mouse ACTB(actin, beta) 对照试剂盒 100 rxns ¥1,100
E13003 Mouse ACTB(actin, beta) 对照试剂盒 200 rxns ¥2,000
E13004 Mouse ACTB(actin, beta) 对照试剂盒 300 rxns ¥2,500
E14001 Mouse GAPDH 对照试剂盒 50 rxns ¥6000
E14002 Mouse GAPDH 对照试剂盒 100 rxns ¥1,100
E14003 Mouse GAPDH 对照试剂盒 200 rxns ¥2,000
E14004 Mouse GAPDH 对照试剂盒 300 rxns ¥2,500
E15001 Rat ACTB(actin, beta) 对照试剂盒 50 rxns ¥600
E15002 Rat ACTB(actin, beta) 对照试剂盒 100 rxns ¥1,100
E15003 Rat ACTB(actin, beta) 对照试剂盒 200 rxns ¥2,000
E15004 Rat ACTB(actin, beta) 对照试剂盒 300 rxns ¥2,500
E16001 Rat GAPDH 对照试剂盒 50 rxns ¥600
E16002 Rat GAPDH 对照试剂盒 100 rxns ¥1,100
E16003 Rat GAPDH 对照试剂盒 200 rxns ¥2,000
E16004 Rat GAPDH 对照试剂盒 300 rxns ¥2,500

 其他基因表达及管家基因内参照试剂盒定制流程

*注:如客户不以来电或Email形式确认地址、电话等相关联系信息,GenePharma将视此次定制申请为无效申请。

吉玛提供的mRNA检测试剂盒为客户提供了一种便捷,准确的基因定量检测方法,吉玛公司为您精心设计的基因特异性引物,并且提供预优化的反应体系,检测特异性强,扩增效率高,为您提供相关基因研究提供了强有力的工具。


试剂盒组成(40μl 反应体系×100次)

SYBR PCR Master Mix(2×Conc.)* 1.0 ml×3支
Taq DNA polymerase (5U/μl) 20μl×1支
*内含dNTP Mixture,Mg2+,SYBR Green I 等。

试剂盒的保存 -20℃ 避光保存,避免反复冻融

产品特点

1、本试剂盒是采用SYBR Green I 染料法进行Real-Time PCR 的专用试剂;

2、反应用的Buffer、dNTP、SYBR Green I等已经按一定浓度比例优化混合在一起,是一种2×浓度的Real-Time PCR试剂;

3、精心优化的Real-Time PCR Buffer 及Taq DNA 聚合酶组合,可直接用于定量PCR实验。

4、定量线性范围宽,重复性好,特异性高

适用的荧光定量PCR仪器

1、ABI PRISM 7000/7300/7500/7900

2、MJ-opticon、Opticon2及Chromo4 系列

3、Bio-Rad IQ系列、Light Cycler、Rotogen 3000

4、X3000P/4000、FTC-2000

 

试剂盒组成(20μl 反应体系×100次)

Real-Time PCR Master Mix(2×Conc.)* 1ml×1支Taq DNA polymerase (5U/μl) 20μl×1支 dd H2O 1ml×1支
*内含内含dNTP Mixture, Mg2+等。

试剂保存

-20℃保存,避免反复冻融。保质期12个月。


产品特点

1、预先优化好的荧光定量PCR反应体系;

2、经实验室验证,适用于多种类型的荧光探针和染料;

3、适用于多种不同体积反应体系。

4、使用方便,只需加入酶、模板、探针/染料即可进行定量PCR反应.

适用的荧光定量PCR仪器


1、ABI PRISM 7000/7300/7500/7900

2、MJ-opticon、Opticon2及Chromo4 系列

3、Bio-Rad IQ系列、Light Cycler、Rotogen 3000

4、MX3000P/4000、FTC-2000

使用方法
Real-time PCR Master Mix的浓度为2×,使用时按5μl/10μl反应体系加入;在加入酶、模板、探针/染料后用水补足至所需体积后即可进行Real-time PCR反应


产品说明

Ezol 试剂是用于总RNA 抽提的试剂,适用于人类、动物、植物、细菌等组织或细胞的总RNA提取。样本经 Ezol 充分裂解后加入氯仿离心,形成上清层、中间层和有机层, 收集上清层用异丙醇沉淀RNA。Ezol试剂操作简便易行,可以同时处理多个样品,并得到高质量的RNA 。纯化的RNA可以直接用于RNA 印迹分析、斑点杂交、poly(A)+ 选择、体外翻译、RNA 酶保护分析、RT-PCR 分析、构建 cDNA 文库等 RNA 研究。

□产品特点

1、可获得高纯度、高产率的 RNA。

2、适用于多种细胞或组织总RNA的提取

3、无论是小量的细胞(5×106)或组织(50-100mg)还是大量的细胞(107)或组织(>1g)都可得到出色的结果。

4、操作简便,可实现RNA的快速抽提。

试剂保存

室温或2-8℃避光保存,保质期12个月。

PROTOCOL

20毫克组织或106-107个细胞/ml Ezol 

混匀后室温搁置15min

按200ul氯仿/ml Ezol加入氯仿,振荡混匀,冰上放置10分钟 

4℃ 12,000 rpm 15min

取上层水相移入0.5 ml EP 管内,加入等体积预冷的异丙醇 

颠倒混匀,室温搁置10~15分钟

4℃ 12,000 rpm 10min,

轻倒上清,吸水纸上沾干, 按1ml乙醇/ml抽提液加入75%冰乙醇轻旋颠倒洗涤 

4℃ 12,000 rpm 5min 轻倒上清,吸水纸上倒扣沾干,适度干燥 

DEPC H2O或TE溶液溶解RNA 28S RNA 18S RNA



图 RNA电泳图
Trouble Shooting of Ezol Total RNA Extraction Reagent

问题

可能原因

解决方法

抽提的RNA有降解

动植物体组织取下后未立即进行抽提或冰冻保存

采用新鲜组织,在研磨过程中不断加入液氮保持组织的生物活性

溶液、试管等用具有RNase 污染

所有与RNA 抽取相关的器具均须做RNase 去除处理

抽提过程中没有戴手套或者没有勤换手套;抽提过程中未注意避免说话,造成唾沫中RNA 酶污染

操作过程中最好戴手套和口罩

RNA 存放的温度较高

RNA储存温度最好为-70℃

RNA得率 
较低

样品匀浆或裂解不完全

适当延长裂解时间,使样品充分裂解

RNA 未完全溶解

避免过度干燥并延长RNA溶解时间

未选用RNA 含量丰富的新生、生长旺盛的组织或细胞

选择较新鲜的,生长旺盛的样品

离心机转速和离心力不能达到要求

加大转速或延长离心时间

抽提的RNA有DNA 污染

样品匀浆后加入的Ezol量过少

在建议用量基础上减少组织量或加大Ezol使用量,或用DNase I处理

将中间层吸入

吸取上清时尽量小心操作

加入氯仿前,样本没有在室温下放置15分钟;

保证样品充分裂解;在环境温度较低的情况下,可适度延长放置时间

加入氯仿后,振荡过于剧烈

轻柔振荡

样品量过多

在建议用量基础上减少组织量或加大Ezol 使用量,或用DNase I处理

OD260/OD280比率偏低(<1.65)

在分光光度计测量前用不适当的溶液稀释RNA样品,低离子强度和低pH溶液会增加280 nm的光吸收值

采用TE 或Tris-HCl溶解样品,检测OD 值

匀浆后样品所加的Ezol用量偏少

在建议用量基础上减少组织量或加大Ezol 使用量


 

 

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