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miRNA阴性对照

GenePharma公司为客户提供不同长度的microRNA mimics control，microRNA mimics control是基于线虫C. elegans 的micoRNA设计的。这个阴性对照已经通过BLASTN比对所有的人、小鼠以及大鼠的基因组序列以及microRNA序列，microRNA序列来自sanger miRNA数据库（http://microrna.sanger.ac.uk/sequences）

产品描述


GMR-miRTM microRNA mimics conrol的应用：

利用GMR-miRTM microRNA mimics control 消除非序列特异性的作用效应
可以全面了解mimics以及背景效应之间的异同


目录号

产品名称

规格

纯化方式

价格

交货期限

B04001

microRNA mimics 单链阴性对照

1 OD

HPLC

￥120

2个工作日

B04002

microRNA mimics 双链阴性对照

1 OD

HPLC

￥120

2个工作日


吉玛为客户提供不同长度的microRNA inhibitors control，microRNA inhibitors control是基于线虫C. elegans 的micoRNA设计的。这个阴性对照已经通过BLASTN比对所有的人、小鼠以及大鼠的基因组序列以及microRNA序列，microRNA序列来自sanger miRNA数据库（http://microrna.sanger.ac.uk/sequences）

GMR-miRTM microRNA inhibitors control的应用：

利用GMR-miRTM microRNA inhibitor control 消除非序列特异性的作用效应
可以全面了解inhibitors以及背景效应之间的异同


目录号

产品名称

规格

纯化方式

价格

交货期限

B04003

microRNA inhibitors 阴性对照

1 OD

HPLC

￥120

2个工作日



标记 microRNA mimics 阴性对照

吉玛为客户提供不同长度的microRNA mimics control，microRNA mimics control是基于线虫C. elegans 的micoRNA设计的。这个阴性对照已经通过BLASTN比对所有的人、小鼠以及大鼠的基因组序列以及microRNA序列，microRNA序列来自sanger miRNA数据库（http://microrna.sanger.ac.uk/sequences） 
GMR-miRTM microRNA FAM labeled microRNA mimics conrol是用来检测microRNA mimics 的转染效率用荧光倒置显微镜可以直接观察转染效果以及siRNA分布情况

目录号

产品名称

规格

纯化方式

价格

交货期限

B04004

FAM标记 microRNA mimics 单链阴性对照

1 OD

HPLC

￥150

2个工作日

B04005

FAM标记 microRNA mimics 双链阴性对照

1 OD

HPLC

￥150

2个工作日


GMR-miRTM FAM 标记 microRNA inhibitors 阴性对照

吉玛为客户提供不同长度的microRNA inhibitors control，microRNA inhibitors control是基于线虫
C. elegans 的micoRNA设计的。这个阴性对照已经通过BLASTN比对所有的人、小鼠以及大鼠的基因组序列以及microRNA序列，microRNA序列来自sanger miRNA数据库（http://microrna.sanger.ac.uk/sequences） 
吉玛GMR-miRTM FAM labeled microRNA inhibitors control用来检测microRNA inhibitor的转染效率以及在细胞内的分布情况。

目录号

产品名称

规格

纯化方式

价格

交货期限

B04006

FAM标记 microRNA inhibitors 阴性对照

1 OD

HPLC

￥200

2个工作日

功能介绍与实验实例

实验数据

使用方法

A．siRNA转染的方法

哺乳动物转染的常见方法有：磷酸钙共沉淀、电穿孔法、DEAE-葡聚糖和polybrene、机械法（例如,显微注射和基因枪）、阳离子脂质体试剂，其中阳离子脂质体试剂转染法是目前最常用的转染方法。

应用脂质体型转染试剂进行转染需要注重的几个方面：

1、转染试剂的用量
2、siRNA的用量
3、转染时的细胞密度
4、转染时的操作顺序
5、细胞与转染试剂/siRNA复合物的温浴的时间


B．Lipofectamin2000 转染试剂

选择最适合的转染试剂和转染条件，往往取决于不同的哺乳动物细胞类型和不同的核酸分子。Lipofectamin2000适用于核酸的体内和体外操作，可应用于DNA、RNA、反义寡核苷酸、siRNA的转染，也可应用于DNA/siRNA的共转染操作；是一种新型的高效siRNA转染试剂。

Lipofectamin2000的应用领域：

1、原代培养细胞和转化细胞株的基因转染
 
2、siRNA高通量转染试验
 
3、DNA转染；DNA和siRNA的共转染
 
4、核酸（siRNA、DNA、RNA）的体内导入试验
 
5、□ 贴壁细胞和悬浮细胞转染


Lipofectamin2000 的特点：

不必更换培养基，操作简便易行，可在半小时内完成操作
 
 
在含血清培养基中也能表现高转染效率
 
 
细胞毒性低；适用细胞广泛
 
 
即用型试剂，可在含有抗生素的完全培养基中转染
 
 
基于脂质的转染试剂，确保没有RNAse活性
 
 
□ 可介导siRNA高转染细胞及体内siRNA的高效导入



C．Lipofectamin2000适用的细胞类型

Lipofectamin2000转染试剂可广泛应用于多种细胞系的DNA和siRNA转染如：HeLa(人颈部癌细胞)、MCF-7(人乳房癌细胞)、Hep3B(人肝细胞癌细胞)、COS-7(猴肾细胞)、Neuro-2a(鼠神经母细胞瘤细胞)、NIKS(人角质化细胞)、B16(鼠黑素瘤细胞)、DLD-1(人结肠癌细胞)、NIH/3T3(鼠胚胎成纤维细胞)、HT-29(人结肠腺癌细胞)、A549(人肺癌细胞)、CHO-k1(仓鼠卵巢细胞)和293(腺病毒5 DNA转化的人胚胎肾细胞),SVRbag4细胞等。



D．转染前细胞培养

在细胞板上培养细胞时，应使细胞汇合在24小时内达到70-90%。

细胞培养用品 表面积（mm2/孔）

细胞密度

培养基（μL /孔）
96孔板 50 1.5´104-5.0´104 100μL
48孔板 100 3.0´104-1.0´105 200μL
24孔板 200 8.0´104-2.0´105 500μL
12孔板 401 1.6´105-4.0´105 1.0 mL
6孔板 962 3.0´105-8.0´105 2.0 mL
35 mm 962 3.0´105-8.0´105 2.0 mL
60 mm 2827 1.0´106-2.5´106 6.0 mL

E．合适的lipofectamin2000用量

合适的siRNA(DNA)：lipofetamin2000比例对核酸的高效转染有重要影响；我们推荐的DNA：lipofetamin2000为1：0.5—1：5（ug:ul），siRNA：lipofectamin2000为1：0.01-1：0.1（pmol：ul）一般情况下，此范围内都可获得高的转染效率。

细胞培养用品 表面积（mm2/孔） 细胞密度 培养基（μL /孔）
96孔板 5pmol/0.2μg 100μL 0.25μl/0.5μl
24孔板 20pmol/0.8μg 500μL 1μl /2μl
12孔板 40 pmol /1.6μg 1 mL 2μl /4μl
6孔板 100 pmol /4.0μg 2 mL 5μl /10μl
35 mm 100 pmol /4.0μg 2 mL 5μl /10μl
60 mm 600 pmol /8.0μg 5 mL 10μl /20μl

产品说明书

相关文献

1.Chen S, Sun YY, Zhang ZX, Li YH, Xu ZM, Fu WN. Transcriptional suppression of microRNA-27a contributes to laryngeal cancer differentiation via GSK-3β-involved Wnt/β-catenin pathway. Oncotarget. 2017 Feb 28; 8(9): 14708-18.  

2.Kong LY, Xue M, Zhang QC, Su CF. In vivo and in vitro effects of microRNA-27a on proliferation, migration and invasion of breast cancer cells through targeting of SFRP1 gene via Wnt/β-catenin signaling pathway. Oncotarget. 2017 Feb; 8(9): 15507-19.

3.Kong X, Liu F, Gao J. MiR-155 promotes epithelial-mesenchymal transition in hepatocellular carcinoma cells through the activation of PI3K/SGK3/β-catenin signaling pathways. Oncotarget. 2016 Oct 4; 7(40): 66051-60. 

4.Li X, Liang Q, Zhang W, Li Y, Ye J, Zhao F, Chen X, Wang S. Bio-inspired bioactive glasses for efficient microRNA and drug delivery. Journal of Materials Chemistry B. 2017 Jul.

5.Ren Y, Chen Y, Liang X, Lu Y, Pan W, Yang M. MiRNA-638 promotes autophagy and malignant phenotypes of cancer cells via directly suppressing DACT3. Cancer Letters. 2017 Apr 1; 390: 126-36. 

6.Sun Y, Xu J, Xu L, Zhang J, Chan K, Pan X, Li G. MiR-503 Promotes Bone Formation in Distraction Osteogenesis through Suppressing Smurf1 Expression. Scientific Reports. 2017 Mar; 7: 409.

7.Xue X, Qiu Y, Yang HL. Immunoregulatory Role of MicroRNA-21 in Macrophages in Response to Bacillus Calmette-Guerin Infection Involves Modulation of the TLR4/MyD88 Signaling Pathway. Cellular Physiology and Biochemistry. 2017 May 12; 42(1): 91-102.

8.Yu F, Guo Y, Chen B, Shi L, Dong P, Zhou M, Zheng J. LincRNA-p21 Inhibits the Wnt/β-Catenin Pathway in Activated Hepatic Stellate Cells via Sponging MicroRNA-17-5p. Cellular Physiology and Biochemistry. 2017 Jun; 41(5): 1970-80.

9.Zhou Z, Wan J, Hou X, Geng J, Li X, Bai X. MicroRNA-27a promotes podocyte injury via PPARγ-mediated β-catenin activation in diabetic nephropathy. Cell death & disease. 2017 Mar; 8(3): e2658.

10.Zeng Z, Wang K, Li Y, Xia N, Nie S, Lv B, Zhang M, Tu X, Li Q, Tang T, Cheng X. Down-regulation of microRNA-451a facilitates the activation and proliferation of CD4+ T cells by targeting Myc in patients with dilated cardiomyopathy. Journal of Biological Chemistry. 2017 Apr 7; 292(14): 6004-13.


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目录分类 本商品目录中的产品介绍按以下内容分类：

1. RNA干扰研究工具
2. MicroRNA研究工具 

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