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公司产品
miRNA抑制剂
有效的抑制内源性成熟miRNA功能,21-23 nt 2’-甲氧修饰的RNA寡核酸设计
产品特点：
1、有效的抑制内源性成熟miRNA功能
2、21-23 nt 2’-甲氧修饰的RNA寡核酸设计3、较低的浓度就能高效长久的抑制miRNA活性
4、GMR-miRTM microRNA Inhibitors 是单链的化学修饰的增强型寡核苷酸对sanger miRNA 数据库:http://microrna.sanger.ac.uk中所有人、小鼠以及大鼠miRNA有效
GMR-miRTM microRNA inhibitors的应用：
1、利用GMR-miRTM microRNA inhibitors抑制活体microRNA活性来研究Loss-of-function效应
2、筛选调控基因表达和影响细胞发育过程的miRNAs3、深入研究miRNA在一些生物过程中的作用，如细胞的发育、增殖、分化和凋亡
4、发现和验证内源性的miRNA target
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目录号 |
产品名称 |
规格（OD） |
纯化方式 |
价格 |
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B03001 |
GMR-miRTM microRNA inhibitors |
2 |
HPLC |
￥350 |
miR-21 inhibitors 实验设计 ，常规Anti-miR-21设计（2’OMe）:
As-miR-21: 5’-UCAACAUCAGUCUGAUAAGCUA-3’
NC：5’-UUGUACUACACAAAAGUACUG-3’
NC-FAM：5’- FAM-UUGUACUACACAAAAGUACUG-3’
全链2’-O-Me修饰。
二、实验方案
1. 细胞培养
293T，A549
7* 10cm dish细胞
Lipofectamin 2000：250ul
Ezol：50ml
Hairpin-it miR-21 qPCR kit (300runs)：1个
2. 转染效率评价
A549细胞接种于24孔板，转染Inhibitor-NC FAM优化转染试剂与inhibitor的浓度配比，转染4-6h，荧光显微镜观察转染效率，确定最佳转染条件：
1. Inhibitor：25nM Lipo：1ul
2. Inhibitor：25nM Lipo：2ul
3. Inhibitor：50nM Lipo：1ul
4. Inhibitor：50nM Lipo：2ul
5. Inhibitor：100nM Lipo：1ul
6. Inhibitor：100nM Lipo：2ul
b. miRNA inhibitor转染
inhibitor 3个浓度梯度：25nM，50nM，100nM；NC选择100nM转染。
| MicroRNA Inhibitor介绍 |
| MicroRNA Inhibitor是用来抑制内源性的MicroRNA的功能。特异的MicroRNA inhibitor能够被导入到表达特异的microRNA的细胞内，抑制MicroRNA的作用，也可以用来抑制表达特异的内源性的miRNA的报告载体的表达。 |
| 抑制特异性的内源性的miRNA |
| 为了分析miRNA对生物过程和内源性的靶的作用效果，miRNA inhibitor 能够被转染入细胞评价此效应能否被逆转。 |
| 转染程序 |
| 转染效率对不同的细胞株和不同的转染试剂是不同的。我们建议miRNA inhibitor 的终浓度为15-100nM |
| 最优化的转染浓度最终还是需要通过试验来确定。我们发现典型的试验中最佳的浓度范围是15-100nM，但是优化的浓度范围我们设定在1-100nM之间。 |
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96孔板 | 24孔板 | 12孔板 | |
转染试剂A |
0.3-1.0 ul |
1-3 ul |
2-4 ul |
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MicroRNA inhibitor B |
3 pmol |
15 pmol |
30 pmol |
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Cell density C |
6000 cells/well |
40,000 cells/well |
80,000 cells/well |
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Final volume per well |
0.1 ml |
0.5 ml |
1.0 ml |
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A：转染试剂的推荐量，根据您订购的试剂不同应做适当的调整 |
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| 转染优化 | ||||
优化转染效率是使得miRNA inhibitor 活性最大化的的最关键的一个因素之一，对每种转染试剂而言，首先要确定一款最合适的转染试剂，主要看从以下几点着手处理： 1、转染试剂的量 2、MicroRNA inhibitor的量 3、转染时的细胞密度 4、转染时候的操作顺序 5、细胞与转染试剂/siRNA复合物的接触时间 |
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目录分类 本商品目录中的产品介绍按以下内容分类：
1. RNA干扰研究工具
2. MicroRNA研究工具
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