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公司产品
shRNA慢病毒产品
慢病毒表达载体包含了包装、转染、稳定整合所需要的遗传信息。慢病毒包装质粒可提供所有的转录并包装RNA到重组的假病毒载体所需要的所有辅助蛋白。为产生高滴度的病毒颗粒，
慢病毒表达载体包含了包装、转染、稳定整合所需要的遗传信息。慢病毒包装质粒可提供所有的转录并包装RNA到重组的假病毒载体所需要的所有辅助蛋白。为产生高滴度的病毒颗粒，需要利用表达载体和包装质粒同时共转染细胞，在细胞中进行病毒的包装，包装好的假病毒颗粒分泌到细胞外的培养基中，离心取得上清液后，可以直接用于宿主细胞的感染，目的基因进入到宿主细胞之后，经过反转录，整合到基因组，从而高水平的表达效应分子。
载体的技术特点
1、大大提高对于一些较难转染的细胞， 如原代细胞、干细胞、不分化的细胞等转导效率
2、目的基因整合到宿主细胞基因组的几率大大增加
3、能够插入大的片段(~4 kb)
4、最低的细胞毒性
本公司使用的慢病毒表达系统，它由三部分组成：慢病毒表达载体、慢病毒包装质粒、可产生假病毒颗粒的细胞系。
慢病毒表达载体包含了包装、转染、稳定整合所需要的遗传信息。慢病毒包装质粒可提供所有的转录并包装RNA到重组的假病毒载体所需要的所有辅助蛋白。为产生高滴度的病毒颗粒，需要利用表达载体和包装质粒同时共转染细胞，在细胞中进行病毒的包装，包装好的假病毒颗粒分泌到细胞外的培养基中，离心取得上清液后，可以直接用于宿主细胞的感染，目的基因进入到宿主细胞之后，经过反转录，整合到基因组，从而高水平的表达效应分子。
慢病毒介导的 siRNA活体实验用病毒液服务流程
对于活体 RNAi实验模型，吉玛公司可以为您生产高质量的病毒液，服务流程如下：
根据目的基因相关信息（序列，序列号等），利用高效的设计软件，设计 siRNA序列，针对每条目的基因，我们设计4条siRNA序列，其中1条序列为阴性对照组；
根据设计好的 siRNA序列，设计，合成两条互补的短片段的DNA；
对合成好的 DNA片段进行稀释，退火，连接到线形化处理过的载体，转化，涂平板，过夜培养；
通过 PCR的方法筛选阳性菌落，进行测序，分析测序结果；
对于测序正确的重组质粒，提取和纯化高质量的不含内毒素的 siRNA病毒穿梭质粒；
利用构建好的质粒做转染实验， 48小时后通过实时荧光定量和Western的方法分析目的基因，筛选出一条最有效的siRNA序列；
筛选出的高效重组载体和病毒包装质粒共转染 293T细胞，进行病毒包装和生产，收集病毒液；
浓缩、纯化病毒液，测定滴度；
提供高质量的病毒液给客户（对于活体实验，我们建议的病毒基本单位为 1×10^9TU/ml ，对于小鼠尾静脉给药建议50~100ul/只）
Lentiviral shRNA的基因沉默效率
Lentiviral shRNA 抑制生长导管形成
Lentiviral shRNA 引起的表型变化
即用型Lentivirus shRNA构建包装服务
Lentivirus shRNA服务特点：
1、适用于原代培养细胞，难以转染的各种细胞
2、可用于制备多种稳定沉默特定基因的细胞株
3、您通过GenePharma SupersilencingTM Vector方法筛选到有效的的基因沉默靶点，如果您需要构建慢病毒载体来满足实验需求
Lentivirus shRNA载体
GenePharma Supersilencing Vector 干扰载体
包装载体：Helper vector-I
Helper vector-II
Helper vector-III
提高包装效率和对特定细胞的感染力,提高生物安全性
品质保证
客户自己提供的序列委托我们制备的病毒颗粒，我们确保制备的病毒颗粒携带片段的正确性，确保病毒颗粒的总数和病毒颗粒的滴度达到合同规定的要求。
siRNA高效表达慢病毒载体构建
1. 通过专业设计人员的精心筛选获得欲筛选的siRNA序列。
2. 设计siRNA 正义、反义链，选择相应loop结构，加上酶切位点的目的序列。
3. 合成相应的DNA序列，然后克隆于相应的慢病毒表达载体。
4. 将载体转化到宿主菌中进行克隆、筛选，得到质粒重组体即siRNA表达载体。
5. siRNA表达载体在真核细胞中可产生siRNA，从而在细胞内产生特定基因的沉默效果。此方法是多种siRNA制备方法中唯一可以进行长期基因沉默研究的方法。
本公司为您提供siRNA高效表达慢病毒载体构建服务。构建好的siRNA表达载体，可直接用于转染细胞进行RNA干扰操作。
服务要求
1. 通过E-mail发送订单，告知选定的相应的基因信息，待构建的靶点信息。靶基因在NCBI数据库中的Gene ID、Accession No.
2. 我们可为您免费设计siRNA序列.
订购流程
1. 请用E-mail或者电话联系吉玛公司。E-mail:order@genepharma.com;Tel:021-51320195。
2. 根据客户提供的基因信息设计siRNA序列，并由客户确认。
3. 根据客户提供的siRNA序列信息或经客户确认的siRNA序列信息设计引物。
4. 根据所选择的慢病毒载体构建相应的siRNA表达载体。
5. 在完成相应的试验后，我们将为您提供一套完整的实验结果，其中包括：实验操作说明、电子版的测序结果及彩图、构建好的siRNA慢病毒表达载体质粒及其穿刺保存菌、试验中所用引物等。
| 目录号 | 产品名称 | 规格 | 价格 | 交货期限 |
| C06001 | 慢病毒干扰载体LV-1 (pGLVU6/GFP) | 50μg | ￥1,000 | 15个工作日 |
| C06002 | 慢病毒干扰载体LV-2N (pGLVU6/Puro) | 50μg | ￥1,000 | 15个工作日 |
| C06003 | 慢病毒干扰载体LV-3 (pGLVH1/GFP+Puro) | 50μg | ￥1,000 | 15个工作日 |
| C06004 | 慢病毒干扰载体LV-9N (pGLVU6/mCherry) | 50μg | ￥1,000 | 15个工作日 |
| C06005 | 慢病毒干扰载体LV-10N (pGLVU6/mCherry/Puro) | 50μg | ￥1,000 | 15个工作日 |
| C06006 | 慢病毒干扰载体LV-12 (pGLVH6/luci05/Puro) | 50μg | ￥1,000 | 15个工作日 |
| C06007 | 慢病毒干扰载体LV-15N (pGLVH1/mCherry/Puro) | 50μg | ￥1,000 | 15个工作日 |
| C06008 | 慢病毒干扰载体LV-16 (pGLVU6/Firefly/Puro) | 50μg | ￥1,000 | 15个工作日 |
| C06027 | 慢病毒干扰载体 LV-U6-Neo | 50μg | ￥1,000 | 15-25个工作日 |
| C06028 | 慢病毒干扰载体 LV-U6-copGFP-T2A-Neo | 50μg | ￥1,000 | 15-25个工作日 |
| C06029 | 慢病毒干扰载体 LV-U6-mCherry-T2A-Neo | 50μg | ￥1,000 | 15-25个工作日 |
| C06030 | 慢病毒干扰载体 LV-U6-Luci17-T2A-Neo | 50μg | ￥1,000 | 15-25个工作日 |
吉玛基因慢病毒shRNA载体图谱
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病毒包装及滴度测定
根据客户的需要克隆目的片段或shRNA序列到所需要的慢病毒载体，然后进行细胞转染及病毒生产。 |
| 目录号 | 产品名称 | 规格 | 价格 | 交货期限 |
| D01001 | 客户定制序列的慢病毒颗粒（提供免费设计） | 一个基因一个序列 （1ml,10*8 TU/ml） | ￥2,880 | 20-25个工作日 |
| D01002 | 客户定制序列的慢病毒颗粒（提供免费设计） | 一个基因一个序列 （1ml,10*9 TU/ml） | ￥3,880 | 20-25个工作日 |
| D02001 | shRNA慢病毒超值套餐 （一个基因设计4个序列，一个阴性对照，各1ml，10*8 TU/ml） | 1 套 | ￥9,800 | 25-30个工作日 |
| D02002 | shRNA慢病毒超值套餐 （一个基因设计4个序列，一个阴性对照，各1ml，10*9 TU/ml）） | 1 套 | ￥13,000 | 25-30个工作日 |
| D03001 | 慢病毒阴性对照（10*8 TU/ml） | 200 ul | ￥500 | 6个工作日 |
| D03002 | 慢病毒阴性对照（10*8 TU/ml） | 600 ul | ￥1,200 | 6个工作日 |
| D03003 | 慢病毒阴性对照（10*8 TU/ml） | 1 ml | ￥1,800 | 6个工作日 |
| D03004 | 慢病毒阴性对照（10*9 TU/ml） | 200 ul | ￥1,000 | 6个工作日 |
| D03005 | 慢病毒阴性对照（10*9 TU/ml） | 600 ul | ￥2,000 | 6个工作日 |
| D03006 | 慢病毒阴性对照（10*9 TU/ml） | 1 ml | ￥3,000 | 6个工作日 |
| D04001 | 筛选有效干扰慢病毒 | 10*8 TU/ml | 询价 | 50-70个工作日 |
| D04002 | 筛选有效干扰慢病毒 | 10*9 TU/ml | 询价 | 50-70个工作日 |
备注：慢病毒需要干冰件运输，除江浙沪外所有地区，需要加收￥300 运费。
慢病毒载体是一类重组逆转录病毒载体,由於其结构和功能的特点作为一种重要的基因转移工具被应用於 基因治疗和细胞分子生物学研究领域，区别一般的逆转录病毒载体，它对分裂细胞和非分裂细胞均具有感染能 力。该载体可以将外源基因有效地整合到宿主染色体上，从而达到持久性表达。在感染能力方面可有效地感染 神经元细胞、肝细胞、心肌细胞、肿瘤细胞、内皮细胞、干细胞等多种类型的细胞，从而达到良好的的基因治 疗效果。慢病毒载体的研究发展得很快，研究的也非常深入。在美国已经开展了临床研究，效果非常理想，因 此具有广阔的应用前景。
1、 大大提高对於一些较难转染的细胞， 如原代细 胞、干细胞、不分裂的细胞等转导效率
2、 目的基因整合到宿主细胞基因组的几率大大增加
3、 能够插入大的片段(~ 7.5 kb)
4、 最低的细胞毒性
慢病毒滴度检测照片
200×荧光显微镜下观察荧光进行滴度检测96孔细胞板 10ul阴性对照病毒原液稀释10-5后，
1ml病毒原液滴度100（一个视野100个荧光细胞）×4（平均4个视野）×105（稀释倍数）×100=4×10^9 TU/ml
慢病毒介导的 siRNA活体实验用病毒液服务流程
对于活体 RNAi实验模型，吉玛可以为您生产高质量的病毒液，服务流程如下：
1、根据目的基因相关信息（序列，序列号等），利用高效的设计软件，设计 shRNA序列，针对每条目的基因，我们设计4条shRNA序列；
2、根据设计好的 shRNA序列，设计，合成两条互补的短片段的DNA；
3、对合成好的 DNA片段进行稀释，退火，连接到线形化处理过的载体，转化，涂平板，过夜培养；
4、通过 PCR的方法筛选阳性菌落，进行测序，分析测序结果；
5、对於测序正确的重组质粒，提取和纯化高质量的不含内毒素的 shRNA病毒穿梭质粒；
6、筛选出的高效重组载体和病毒包装质粒共转染 293T细胞，进行病毒包装和生产，收集病毒液；
7、浓缩、纯化病毒液，测定滴度；
8、提供高质量的病毒液给客户（对於活体实验，我们提供的病毒基本单位为 1×10^8TU/ml ，这个单位为一只小鼠一次实验的平均用量）
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14.Zhang C, Zhang W, Lu Y, et al. NudC regulates actin dynamics and ciliogenesis by stabilizing cofilin 1. Cell research. 2016 Feb; 26: 239-53.
目录分类 本商品目录中的产品介绍按以下内容分类：
1. RNA干扰研究工具
2. MicroRNA研究工具
产品价格 本产品目录中标示的价格均为国内统一零售参考价，全部为人民币价格。如果大量定购时，在标准价格的基础上有不同程度的优惠。
质量保证 凡吉玛公司的产品均有严格的质量保证。如果我们发现确实存在质量问题时，保证更换产品。如果在到货后一个月之内用户无提出异议，我们将视本产品为优良产品而不再受理投诉事宜。提出产品异议（或投诉）时，切莫在产品使用完（或快使用完）后提出，以备本公司回收产品，确认产品质量。由于订错产品而产生的退货情况，原则上由客户承担相关费用。发生投诉事宜时，公司只保证在产品价格额度范围之内酌情赔偿，恕不受理超过制品价格额度以上之部分。退款时需退还原始发票。
交通运输 吉玛公司承诺以最快捷的运送方式保证用户及时收到订购的产品。由总部直接发货，如一次订货达1，000元可免运费；不足1，000元的订货，我们根据具体情况酌情收费(上海地区免运费）。我们公司产品一般采用快递方式发货。另外对应需要特殊运输的产品（例如病毒产品等冷链运输产品）需要收取300元的特殊运输费用。
下单前请务必核对订购表客户信息和订购内容无误，订单一经确认，当天即启动生产。 超过当日17：00后不能修改或者取消，如果需要取消订单，由此产生的费用，将由客户承担。
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（1）当日17：00前，免费修改或取消。
（2）当日17：00到次日17：00前，按该项产品金额的50%收取。
（3）次日17：00后，按该项产品金额的100%收取。
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