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化学合成及荧光标记的siRNA Oligo Offer!

 

最高质量:HPLC纯化>97%最优价格600元/对迅速交货:6个工作日 多种选择:化学修饰及荧光标记等
超值服务:免费设计,附送对照。
订货电话: 021-51320195  E-mail:order@genepharma.com
 
 
 
siRNA
miRNA
shRNA
慢病毒
RNAi服务
实时荧光定量
荧光双标探针
全基因合成
高通量测序
 
  产品介绍
载体的技术特点
  1. 大大提高对于一些较难转染的细胞, 如原代细胞、干细胞、不分化的细胞等转导效率
  1. 快速获得高水平的表达
  1. 目的基因整合到宿主细胞基因组的几率大大增加
  1. 将免疫反应降到最低
  1. 能够插入大的片段(~7.5 kb)
  1. 能够应用于干细胞研究
  1. 最低的细胞毒性

 

慢病毒表达系统

本公司使用的慢病毒表达系统,它由三部分组成:

  1. 慢病毒表达载体
  2. 慢病毒包装质粒
  3. 可产生假病毒颗粒的细胞系



慢病毒表达载体包含了包装、转染、稳定整合所需要的遗传信息。慢病毒包装质粒可提供所有的转录并包装RNA到重组的假病毒载体所需要的所有辅助蛋白。为产生高滴度的病毒颗粒,需要利用表达载体和包装质粒同时共转染细胞,在细胞中进行病毒的包装,包装好的假病毒颗粒分泌到细胞外的培养基中,离心取得上清液后,可以直接用于宿主细胞的感染,目的基因进入到宿主细胞之后,经过反转录,整合到基因组,从而高水平的表达效应分子。

慢病毒介导的 siRNA活体实验用病毒液服务流程

对于活体 RNAi实验模型,吉玛公司可以为您生产高质量的病毒液,服务流程如下:

根据目的基因相关信息(序列,序列号等),利用高效的设计软件,设计 siRNA序列,针对每条目的
基因,我们设计3条siRNA序列,其中1条序列为阴性对照组;

  1. 根据设计好的 siRNA序列,设计,合成两条互补的短片段的DNA;
  2. 对合成好的 DNA片段进行稀释,退火,连接到线形化处理过的载体,转化,涂平板,过夜培养;
  3. 通过 PCR的方法筛选阳性菌落,进行测序,分析测序结果;
  4. 对于测序正确的重组质粒,提取和纯化高质量的不含内毒素的 siRNA病毒穿梭质粒;
  5. 利用构建好的质粒做转染实验, 48小时后通过实时荧光定量和Western的方法分析目的基因,筛选出一条最有效的siRNA序列;
  6. 筛选出的高效重组载体和病毒包装质粒共转染 293T细胞,进行病毒包装和生产,收集病毒液;
  7. 浓缩、纯化病毒液,测定滴度;
  8. 提供高质量的病毒液给客户(对于活体实验,我们提供的病毒基本单位为 1×108ifu ,这个单位为一只小鼠一次实验的平均用量)
Lentiviral shRNA的基因沉默效率
Lentiviral shRNA 抑制生长导管形成
Lentiviral shRNA 引起的表型变化
即用型Lentivirus shRNA构建包装服务
Lentivirus shRNA服务特点
  1. 适用于原代培养细胞,难以转染的各种细胞
  2. 可用于制备多种稳定沉默特定基因的细胞株
  3. 您通过GenePharma SupersilencingTM Vector方法筛选到有效的的基因沉默靶点,如果您需要构建慢病毒载体来满足实验需求
Lentivirus shRNA载体

GenePharma Supersilencing Vector 干扰载体
包装载体:Helper vector-I

  1. Helper vector-II
  2. Helper vector-III

提高包装效率和对特定细胞的感染力,提高生物安全性

品质保证

客户自己提供的序列委托我们制备的病毒颗粒,我们确保制备的病毒颗粒携带片段的正确性,确保病毒颗粒的总数和病毒颗粒的滴度达到合同规定的要求。

siRNA高效表达慢病毒载体构建

1. 通过专业设计人员的精心筛选获得欲筛选的siRNA序列

2. 设计siRNA 正义、反义链,选择相应loop结构,加上酶切位点的目的序列,

3. 合成相应的DNA序列,然后克隆于相应的慢病毒表达载体

4. 将载体转化到宿主菌中进行克隆、筛选,得到质粒重组体即siRNA表达载体。

5. siRNA表达载体在真核细胞中可产生siRNA,从而在细胞内产生特定基因的沉默效果。此方法是多种siRNA制备方法中唯一可以进行长期基因沉默研究的方法。

本公司为您提供siRNA高效表达慢病毒载体构建服务。构建好的siRNA表达载体,可直接用于转染细胞进行RNA干扰操作。

服务要求
1. 通过E-mail发送订单,告知选定的相应的基因信息,待构建的靶点信息。靶基因在NCBI数据库中的Gene ID、Accession No.
2. 我们可为您免费设计siRNA序列.

订购流程

1. 请用E-mail或者电话联系吉玛公司。E-mail:order@genepharma.com;Tel:021-51320195
2. 根据客户提供的基因信息设计siRNA序列,并由客户确认。
3. 根据客户提供的siRNA序列信息或经客户确认的siRNA序列信息设计引物。
4. 根据所选择的慢病毒载体构建相应的siRNA表达载体。
5. 在完成相应的试验后,我们将为您提供一套完整的实验结果,其中包括:实验操作说明、电子版的测序结果及彩图、构建好的siRNA慢病毒表达载体质粒及其穿刺保存菌、试验中所用引物等。

 

目录号

产品名称

规格

价格

交货期限

C06001

慢病毒干扰载体 LV-1 (pGLVU6/GFP)

50μg 

1,000

2

C06002

慢病毒干扰载体 LV-2 (pGLVU6/Puro)

50μg 

1,000

2

C06003

慢病毒干扰载体 LV-3 (pGLVH1/GFP+Puro)

50μg 

1,000

2

C06004

慢病毒干扰载体 LV-9 (pGLVU6/RFP)

50μg 

1,000

2

 

病毒包装及滴度测定

根据客户的需要克隆目的片段或shRNA序列到所需要的慢病毒载体,然后进行细胞转染及病毒生产。

产品提供形式

1  构建好的慢病毒载体第一次包装与纯化,滴度至少为1×10^8TU/ml。

2  包装与纯化后的病毒载体续包装,每次包装滴度至少为1×10^8TU/ml。

3  如果需要大量病毒液用于动物实验,我们可提供滴度达10^10 TU/ml以上高度纯化的病毒液。

4  现有的GAPDH阳性对照病毒液,每支包装滴度至少为1×10^8TU/ml。

 

目录号

产品名称

规格

价格

交货期限

D01001

客户定制序列的慢病毒颗粒(提供免费设计)

一个基因一个序列

1ml,10*8 TU/ml

2,880

3

D01002

客户定制序列的慢病毒颗粒(提供免费设计)

一个基因一个序列

1ml,10*9 TU/ml

3,880

3

D02001

shRNA慢病毒超值套餐

(一个基因设计4个序列,一个阴性对照,各1ml10*8 TU/ml

1

9,800

4

D02002

shRNA慢病毒超值套餐

(一个基因设计4个序列,一个阴性对照,各1ml10*9 TU/ml))

1

13,000

4

D03001

慢病毒阴性对照(10*8 TU/ml

200 ul

500

6个工作日

D03002

慢病毒阴性对照(10*8 TU/ml

600 ul

1,000

6个工作日

D03003

慢病毒阴性对照(10*8 TU/ml

1 ml

1,800

6个工作日

D03004

慢病毒阴性对照(10*9 TU/ml

200 ul

1,000

6个工作日

D03005

慢病毒阴性对照(10*9 TU/ml

600 ul

2,000

6个工作日

D03006

慢病毒阴性对照(10*9 TU/ml

1 ml

3,000

6个工作日

D04001

筛选有效干扰慢病毒

10*8 TU/ml

询价

50-70个工作日

D04002

筛选有效干扰慢病毒

10*9 TU/ml

询价

50-70个工作日

备注:慢病毒需要干冰件运输,除江浙沪外所有地区,需要加收¥300 运费。
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